Marcatura del DNA, sequenziamento, PCR
Prof. Vincenzo De Simone
Dott.ssa Luisa De Magistris
Caratteristiche comuni dei metodi “classici” di sequenziamento del DNA (Maxam&Gilbert e Sanger)
Nel filmato sono mostrati due sequenziatori automatici in cui i frammenti dei campioni di DNA da sequenziare sono separati mediante elettroforesi capillare.
I due sequenziatori di DNA, rispettivamente a 48 ed a 16 capillari (mod.3730 e 3100 della Applera Genomics), sono installati presso il servizio di sequenziamento del DNA del CEINGE Biotecnologie Avanzate di Napoli.
Nel filmato è mostrato in azione una stazione di pipettaggio automatizzato della Beckmann installata presso il servizio di sequenziamento del DNA del CEINGE Biotecnologie Avanzate di Napoli.
Nel filmato è mostrato l’assemblaggio in laboratorio di una reazione di PCR.
L’apparecchio per la PCR (termocycler) mostrato nel filmato è il mod. 3700 della Applied Biosystems.
Nel filmato sono mostrati due sintetizzatori automatici di oligonucleotidi della Applied Biosystems.
Argomenti ed organizzazione del corso di Biologia Molecolare in formato e-learning
1. Composizione chimica e conformazioni degli acidi nucleici
2. Organizzazione della cromatina eucariotica
3. Metodiche di estrazione e di analisi degli acidi nucleici
4. Componenti e funzionamento della forca di replicazione
5. Controllo dell'inizio e della terminazione della replicazione
7. Ricombinazione e Riparo del DNA
8. Ricombinazione sito-specifica e trasposoni
9. Costruzione di molecole ricombinanti in vitro
10. Struttura e funzionamento dell'RNA polimerasi batterica
11. Regolazione della trascrizione nei procarioti
12. I saggi EMSA e DNAse I footprinting
13. Le tre RNA polimerasi eucariotiche ed i relativi promotori
14. Regolazione della trascrizione negli eucarioti
15. Studio dei promotori e delle unità trascrizionali eucariotiche
16. RNA catalitici e maturazione degli RNA eucariotici
17. Ribozimi ed RNA interference
18. Applicazioni pratiche dei ribozimi e dell'RNA interference
19. Le tappe della sintesi delle proteine in procarioti ed eucarioti
Alberts B & al. Biol. Mol. della Cellula (essenziale) Zanichelli Cap. 10
Brown TA Genomi II EdiSES Cap. 4,6
Brown TA Biotecnologie Molecolari Zanichelli Cap. 9,10
Lewin B Il Gene (ed. compatta) Zanichelli
Watson JD & al. Biologia Molecolare del Gene Zanichelli Cap. 20
Argomenti ed organizzazione del corso di Biologia Molecolare in formato e-learning
1. Composizione chimica e conformazioni degli acidi nucleici
2. Organizzazione della cromatina eucariotica
3. Metodiche di estrazione e di analisi degli acidi nucleici
4. Componenti e funzionamento della forca di replicazione
5. Controllo dell'inizio e della terminazione della replicazione
7. Ricombinazione e Riparo del DNA
8. Ricombinazione sito-specifica e trasposoni
9. Costruzione di molecole ricombinanti in vitro
10. Struttura e funzionamento dell'RNA polimerasi batterica
11. Regolazione della trascrizione nei procarioti
12. I saggi EMSA e DNAse I footprinting
13. Le tre RNA polimerasi eucariotiche ed i relativi promotori
14. Regolazione della trascrizione negli eucarioti
15. Studio dei promotori e delle unità trascrizionali eucariotiche
16. RNA catalitici e maturazione degli RNA eucariotici
17. Ribozimi ed RNA interference
18. Applicazioni pratiche dei ribozimi e dell'RNA interference
19. Le tappe della sintesi delle proteine in procarioti ed eucarioti
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